质粒类型: | 哺乳细胞表达载体 |
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启动子: | CMV |
表达水平: | 高 |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小: | 6310 bp (查看载体序列) |
5' 测序引物: | CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' |
3' 测序引物: | hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA |
载体标签: | C-3xFlag |
载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
筛选标记: | Neomycin (新霉素) |
p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3 kb的载体,从pCMV5载体衍生而来,用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位(Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp)。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。
载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了Flag融合蛋白基因的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418的能力,允许筛选转染成功的细胞株。
pP3XFLAG-CMV-14表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用SV40 T抗原表达的宿主细胞系,如COS细胞,复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。