质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
---|---|
启动子: | T7 |
载体标签: | N-His,N-DsbA |
酶识别位点: | thrombin |
载体抗性: | Ampicillin |
5' 测序引物及序列: | 5 GCT AGT TAT TGC TCA GCG G 3 |
3' 测序引物及序列: | 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
pET-DsbA表达载体采用T7启动子和DsbA基因融合表达,同时选用凝血酶切割位点。DsbA是近年来发现帮助二硫键形成的重要分子内伴侣之一。本试剂盒DsbA基因去掉了信号肽,同时将DsbA氧化还原功能相关的两个半胱氨酸(cys)突变成丝氨酸(ser),这样与突变后的DsbA融合可实现许多基因的胞内可溶性有活性的高表达(表达量大于30%),如IGF-1、IGFBP、EGF、Insulin等。
DsbAmut(E.coli)编码氨基酸序列如下(含多克隆位点):
MGSSHHHHHHSSGAQYEDGKQYTTLEKPVAGAPQVLEFFSFFSPHSYQFEEVLHISDNVKKKLPEGVKMTKYHVNFMGGDLGKDL
TQAWAVAMALGVEDKVTVPLFEGVQKTQTI RSASDIRDVFINAGIKGEEYDAAWNSFVVKSLVAQQEKAAADVQLRGVPAMFVNGKY
QLNPQGMDTSNMDVFVQQYADTVKYLSEKKGDEDEDEDSMYPRGSAEFSAS
223 Amino Acids
Molecular Weight 24.7KD