质粒类型: | 毕赤酵母表达载体 |
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表达水平: | 高拷贝 |
诱导方法: | 半乳糖 |
启动子: | GAL1 |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小: | 6039 bp (查看载体序列) |
5' 测序引物及序列: | T7: TAATACGACTCACTATAGGG |
3' 测序引物及序列: | CYC1 Terminator: GTGACATAACTAATTACATGATG |
载体标签: | N-His, N-Xpress, C-His, C-V5 |
载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
筛选标记: | URA3 |
备注: | 利用半乳糖诱导蛋白在酿酒酵母中表达。 |
pYES2 NT B的是一个6.0 kb的载体,设计用来在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中诱导表达重组蛋白。 该载体包含以下元素: 1. 酵母GAL1启动子,能够在酿酒酵母中被半乳糖高水平的诱导蛋白表达目的蛋白,同时能够被葡萄糖抑制表达 2.多克隆位点可以使用的很多限制酶切位点,便于基因插入。 3.CYC1终止子能够有效终止mRNA的转录。 4.能够利用URA3基因筛选带有ura3基因型的酵母宿主菌株转化子。 5.氨苄抗性基因能够方便在大肠杆菌中的进行载体筛选。 6. 载体本身带有N端His和Xpress标签,同时载体C端也带有V5抗原表位和His纯化标签。 8. 在酵母中,利用载体上的2μ复制子维持质粒的高拷贝。