质粒类型: | 枯草芽孢杆菌表达载体 |
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骨架载体: | pHT315 |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体标签: | GFP |
根据绿色荧光蛋白基因和枯草芽孢杆菌木糖诱导型启动子PxylR序列, 分别设计两对特异引物primers PxyF/R 和primers gfpF/R,扩增获得了完整的启动子PxylR和gfp基因序列。进一步以上述产物混合物为模板,以primer PxyF/ primer gfpR做引物进行重迭PCR,获得了PxylR-gfp重组翻译融合表达盒。经Sph I和Kpn I完全酶切 后,将PxylR-gfp表达盒插入大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,得到相应的重组表达质粒pGFP315。