pRL-TK 载体

pRL 家族是野生型海肾萤光素酶(Rluc) 报告基因对照载体。pRL 载体提供组成型表达的海肾萤光素酶，可与一个萤火虫萤光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾萤光素酶的表达为实验的萤火虫萤光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL 载体包含一个编码海肾萤光素酶(Rluc) 的cDNA, 这个cDNA 从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis) 中克隆而来。目前有四个不同的启动子构造。其中HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK) 相对较弱， 更适用于海肾萤光素酶报告基因载体的中性组成型表达。早期SV40 增强子/ 启动子区域(pRL-SV40) 和CMV 极早期增强子/ 启动子区域(pRL-CMV)一般提供高水平转录，因此可能不适于作为实验载体带有强调控元件的共报告基因。一般我们建议在将要应用的目标细胞中验证某一个特定共报告基因的性能。除了经过修饰的Rluc 报告基因外，所有pRL载体均是从dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分离而来，这样可以使用对dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性内切酶进行消化。