pPIC3.5 载体

pPIC3.5酵母表达载体详细信息如下:

1. 载体大小为7,751 bp，是非融合蛋白表达载体。
2. 单一限制性内切酶位点有BamH I, SnaB I, EcoR I, Avr II 和Not I.
3. 胞内基因表达载体，不是分泌性蛋白表达载体。
4. 载体构建时，需要包含一个ATG启动子，同时需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)
5. 毕赤酵母中使用HIS4基因筛选。
6. 将基因插入GS115和KM71的AOX1中，需要使用Sac I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+，KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
7. 将基因插入GS115和KM71的HIS4中，需要使用Sal I或 Stu I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+，KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
8. 将基因插入GS115的AOX1基因中，也可以使用Bgl II 限制酶线性化质粒，产生的酵母基因型为His+ MutS。