质粒类型: | 毕赤酵母蛋白表达载体 |
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表达水平: | 高拷贝 |
启动子: | AOX1 |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小: | 3328 bp (查看载体序列) |
5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´ |
3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
载体标签: | C-Myc, C-His |
筛选标记: | Zeocin (博莱霉素) |
备注: | 插入基因是必需包含起始密码子ATG。 |
pPICZ A,B和C是3.3 kb的毕赤酵母蛋白载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含有一个C-端多肽,多太重含c-myc和C-His标签。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包括X33,GS115菌株,SMD1168H,KM71H。 pPICZ系列载体包含以下元素: •5'片段含有AOX1启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis等,1985; Koutz等人,1989;tschopp等人,1987A)。 •Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选(Baron等人,1992; Drocourt等人,1990)。 •C-端含Myc和His标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。 •pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。