出品公司: | Novagen/ Millipore |
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菌株类型: | E.coli |
培养基: | LB培养基 |
生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: | Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pLysSRARE2 (CamR, StrR, TetR) |
抗性: | 氯霉素,链霉素,四环素 |
质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
应用: | 蛋白表达 |
诱导方法: | IPTG |
Rosetta-gami 2系列菌株是集合了Rosetta 2系列菌株和Origami 2系列菌株的有点,增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。
Rosetta-gami 2(DE3)pLysS系列菌株是来源于Origami 2系列菌株。而Origami 2 系列菌株是卡那敏感的K-12细胞菌株,携带有TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。
本菌株含有pRARE2质粒,除了能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有 的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA外,还提供了第七个稀有密码子CGG的tRNA。同时,pRARE2质粒具有氯霉素抗性。通过提供原本在大肠杆菌中稀少 的真核细胞密码子,增加了真核细胞的在大肠杆菌中的蛋白表达水平。
Rosetta-gami 2(DE3)pLysS感受态细胞中的Gor基因突变使得菌株具有四环素抗性。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。
亮氨酸生长缺陷型菌株。